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高压灭菌器的正确操作是保证操作人员的人身财产安全的重要前提，下面是小编为高压灭菌器用户提供的标准高压灭菌器的操作步骤。
1、取出高压灭菌器，将腔体杂物清理干净，使用前一定要仔细参考高压灭菌器说明书，若有专人管理，建议用户打印一份操作流程。
2、将高压灭菌器放置于平稳安全处，把手动排水阀拧至‘关闭’处，向灭菌器内加入蒸馏水(—般10L多点)，加水时要缓慢些，以免加入过多的水从而影响仪器正常工作，直至高水位灯亮时，再多加入1～2L即可。
3、可根据具体的灭菌物品设定温度和时间，具体操作如下：
按“设定”键，此时显示为温度设定，可以按上下箭头键，即可设置自己想要的数值，用同样的方法可设定灭菌时间。
对于不同灭菌物品的灭菌操作要求：
将灭菌物品放入腔体摆放整齐，需注意的是，物品摆放的高度要低于腔体，以免堵塞顶部排气阀门，造成危险。不同的灭菌物灭菌的方法和时间都有区别，特别要注意的是敷料的灭菌，敷料是装在不锈钢器皿中的，多数用户都忘记打开敷料盒的通气小孔，以致于每次灭菌达不到试纸条的颜色，造成灭菌失败。一些器具的灭菌是用布带扎好灭菌，灭菌完毕后，不要拆开包装的布带，否则会再次污染。
对液体和培养基灭菌时，注意当灭菌完毕后，一定要让高压灭菌器自然排气冷却，万不可快速放气，急剧冷却，以免造成玻璃容器因温度骤变而引起爆裂，从而威胁实验人员的安全和造成高压灭菌器污染。
在灭菌物品上盖一层布，这样灭菌后的物品不会因潮湿而担心灭菌效果，尽量让高压灭菌器自然冷却，禁止打开上方的安全阀和排气阀，以免造成高压气体伤人的危险。高压灭菌器建议一个月打开一次仪器上方的安全阀和排气阀，以免造成锈蚀直致锈死而带来危险。
4、旋紧门盖，将高压灭菌器下方的手动排气阀拧至排气的适当位置，以方便腔体气体均匀温度，此时连锁开关闭合，连锁灯亮起，仪器开始工作。
5、高压灭菌器工作，温度开始升高，厂家提供的高压灭菌器在出厂时，均有欠压蜂鸣的功能，高压灭菌器会一直响，直至压力灯亮，蜂鸣声停止。